Alzheimer’s Dementia：高通量解析阿尔茨海默病与神经退行性疾病血浆标志物新图谱

近年来，免疫学方法的进步为阿尔茨海默病（AD）和其他神经退行性疾病的生物标志物研究提供了新的工具。尽管血浆中的磷酸化tau蛋白（p-tau217）等标志物已被证明在AD的诊断中具有重要价值，但仍需更多标志物以区分其他类型的痴呆症，并更全面地监测疾病进展。本研究采用了一种新型的高通量技术——核酸连接免疫夹心法（NULISA）中枢神经系统（CNS）面板，对血浆、血清和脑脊液（CSF）中的多种蛋白质进行了定量分析，旨在探索AD、轻度认知障碍（MCI）、路易体痴呆（LB）以及颗粒蛋白前体（GRN）突变携带者中的生物标志物变化。

研究团队在四个队列中进行了分析，包括通过CSF生物标志物确定的AD和非AD患者（队列1）、MCI患者（队列2）、LB病理阳性和阴性患者（队列3）以及GRN突变携带者和非携带者（队列4）。NULISA技术通过结合DNA条形码的捕获和检测抗体，形成免疫复合物，随后通过磁珠纯化和测序，实现了对多种蛋白质的高灵敏度检测。数据分析采用了线性模型（LIMMA）和多重比较校正（FDR），以评估不同组间的蛋白质表达差异，并通过受试者工作特征曲线（AUROC）评估标志物的诊断准确性。

在AD患者中，血浆和血清中的p-tau217、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和p-tau231显著上调，且与CSF中的变化高度一致。值得注意的是，p-tau217在区分AD和非AD患者中表现出极高的诊断价值，其与现有单重免疫测定和质谱结果高度相关。此外，MCI患者中，p-tau217的升高同样显著，同时伴随炎症相关蛋白（如IL-6、TNF）的下调，以及淀粉样蛋白（Aβ38和Aβ42）的减少。在LB病理患者中，Aβ42和血管内皮生长因子受体（FLT1）显著上调，而p-tau217和神经元特异性烯醇化酶（ENO2）下调，提示这些标志物可能有助于区分AD和LB病理。GRN突变携带者中，神经丝轻链（NfL）、神经颗粒蛋白和TDP-43等蛋白质的显著上调，为额颞叶痴呆（FTD）的诊断提供了潜在的血浆标志物。

研究还揭示了血浆和血清中蛋白质检测的差异，约30%的蛋白质在两种基质中相关性较低，例如p-tau181和Aβ42。然而，NfL和GFAP在血浆和血清中表现出高度一致性，支持其在临床中的应用价值。此外，CSF与血浆之间的蛋白质相关性较强，如C反应蛋白（CRP）和血小板衍生生长因子受体β（PDGFRβ），进一步验证了这些标志物的可靠性。

这项研究展示了NULISA技术在神经退行性疾病生物标志物研究中的潜力，不仅验证了已知标志物（如p-tau217和NfL）的可靠性，还发现了与疾病病理相关的新型蛋白质变化。这些发现为AD和其他神经退行性疾病的诊断、分型和治疗监测提供了新的工具和思路。未来的研究需要在更大规模的队列中验证这些初步结果，并进一步探索这些标志物在临床实践中的应用价值。

原始出处：

Ashton NJ, Benedet AL, Di Molfetta G, et al. Biomarker discovery in Alzheimer’s and neurodegenerative diseases using Nucleic Acid Linked Immuno-Sandwich Assay. Alzheimer’s Dement. 2025;21:e14621. https://doi.org/10.1002/alz.14621