Phytomedicine：化瘀通痹方通过抑制HIF1A/VEGFA/ANGPT轴和抑制血管生成来减轻类风湿关节炎

背景：血管生成是类风湿关节炎（RA）的发病机制中不可或缺的一部分，它有助于滑膜增生、滑膜形成和骨破坏的进展。目前治疗类风湿性关节炎的方法包括传统的合成疾病缓解抗风湿药（csDMARDs）、生物抗风湿药（bDMARDs）、糖皮质激素和非甾体抗炎药（NSAIDs）。然而，这些治疗方法中没有一种专门针对RA血管生成，并且大约20%的患者在这些治疗中没有达到令人满意的控制。此外，某些药物存在胃肠道反应和免疫抑制等风险。

中医药（TCM）提供了一种潜在的解决方案，具有低毒性和减少耐药性的有效性。化瘀通痹方（HT）是一种治疗类风湿性关节炎的中药，由丹参、穿山龙、黄芪、附子、白芍、延胡索、甘草组成。HT联合甲氨蝶呤（MTX）显示出与来氟米特（LEF）联合MTX相当的疗效，改善类风湿因子（RF）、C反应蛋白（CRP）、血沉（ESR）和疾病活动评分28（DAS28），不良反应较少。此外，HT含有活血化瘀药，可抑制血管生成，使其成为一种有前景的治疗选择。据推测，HT可能对血管生成靶向具有类似的作用。然而，化瘀通痹方对血管生成的确切作用尚不确定。

目的：探讨HT对RA血管生成的影响及其可能的分子机制。

方法：采用网络药理学方法筛选HT的靶标谱和药理作用。体外用CoCl₂刺激RA-FLS模拟缺氧条件。用条件培养基（CM）培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs），从RA-FLS中添加HT或HIF1A抑制剂LW-6，研究滑膜细胞分泌物对血管生成的影响，包括增殖、迁移、粘附和管腔形成。Western blot检测缺氧诱导因子1亚单位α(HIF1A)、血管内皮生长因子受体2（VEGFR2）和磷酸化的VEGFR2（p-VEGFR2）蛋白水平。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定VEGFA分泌量，实时荧光定量PCR （qRT-PCR）测定VEGFA、血管生成素1 （ANGPT1）、ANGPT2 mRNA表达量。

在体内建立胶原诱导关节炎（CIA）模型。采用苏木精-伊红（HE）染色观察病理变化及血管计数，x线观察骨结构，免疫荧光法对成熟血管和未成熟血管进行分类，免疫组织化学和ELISA进一步验证机制。采用液相色谱-质谱法（LC-MS）鉴定含HT药物血清的有效成分，并通过生物信息学分析鉴定潜在代谢物。

结果：网络药理学分析提示HT在血管生成中的潜在靶点，与HIF1A和VEGF通路相关。在体外，HT可以逆转细胞系的增殖、迁移和粘附，并抑制HUVECs的管腔形成。HT（10%和15%）有效降低HIF1A和VEGFA表达，减弱VEGFR2水平及其磷酸化，下调VEGFA、ANGPT1和ANGPT2 mRNA水平。

在体内，HT减轻炎症和骨破坏，减少滑膜中未成熟（CD31+/α-SMA-）和成熟（CD31+/α-SMA+）血管计数，抑制HIF1A-VEGFA-ANGPT轴。最后，从HT含药血清中成功鉴定出19种有效成分，还发现HT可能影响脯氨酸和酪氨酸代谢等代谢途径，而这些代谢途径已被报道参与血管生成。

结论：HT具有缓解RA血管生成的良好作用，至少部分是通过抑制HIF1A-VEGFA-ANGPT轴，减少RA-FLS与HUVECs之间的串导。该研究结果表明，HT是治疗RA血管生成的候选药物。

原始出处：

Chen Z, Guo X, Wu S, et al. Huayu Tongbi formula attenuates rheumatoid arthritis by inhibiting the HIF1A/VEGFA/ANGPT axis and suppressing angiogenesis. Phytomedicine. Published online February 10, 2025. doi:10.1016/j.phymed.2025.156479