【Nat Cancer】4-1BB共刺激的CD19 CAR-NK治疗R/R LBCL的中国多中心I期研究

CAR-NK

CAR-T细胞疗法在血液系统恶性肿瘤中显示出疗效，但存在高成本、T细胞采集质量不佳和严重毒性等问题。CAR-NK细胞疗法作为一种新型免疫疗法，具有更好的安全性、通过CAR依赖和非依赖机制增强肿瘤杀伤活性等优势。CAR-NK细胞可以标准化生产，作为“现货型”细胞产品，具有成为下一代癌症免疫疗法候选者的潜力。

国内学者使用脐带血来源的NK细胞，通过巴布亚猿包膜假型慢病毒载体（BaEV-LV）转导，构建了含有CD19结合单链片段可变区（scFv）、4-1BB和CD3ζ信号内域的CAR。在体外实验中，CD19-BBz CAR-NK细胞显示出比未转染NK细胞更高的杀伤活性。在NSG小鼠模型中，CD19-BBz CAR-NK细胞可显著减少肿瘤负荷并提高生存率。

随后开展了一项I期研究，评估了该CD19-BBz CAR-NK细胞治疗复发难治性大B细胞淋巴瘤（R/R LBCL）的疗效和安全性，近日发表于《Nature Cancer》，通讯作者为浙江大学医学院附属第二医院钱文斌教授、同济大学附属同济医院梁爱斌教授和孙毅教授、杭州市第一人民医院童向民教授。

研究方法&结果

研究设计：该研究是一项单中心、单臂、开放标签1期研究，评估CD19-BBz CAR-NK细胞在R/R LBCL患者中的安全性和疗效。患者接受清淋化疗，随后在第0天、第7天和第14天接受递增剂量的CD19-BBz CAR-NK细胞治疗。主要终点为安全性、最大耐受剂量和30天内的总缓解率。

安全性：在8例接受治疗的患者中，未观察到剂量限制性毒性，未达到最大耐受剂量。没有患者出现细胞因子释放综合征（CRS）、神经毒性或移植物抗宿主病（GvHD）。

疗效：总缓解率为62.5%（5/8），其中4例患者（50%）达到完全缓解（CR）。中位无进展生存期为9.5个月，中位总生存期未达到。

CAR-NK细胞的扩增和持久性：通过流式细胞术和数字PCR（ddPCR）分析，CAR-NK细胞在输注后4至7天达到最高数量，并在反应良好的患者中观察到CAR-NK细胞的扩增和长期持久性。

血清细胞因子分析：与CAR-T细胞疗法不同，CD19-BBz CAR-NK细胞治疗后的血清细胞因子谱变化较小，大多数细胞因子在输注后4周内保持基础水平。

单细胞RNA测序分析：通过单细胞RNA测序分析，发现与CR相关的CAR-NK产品具有更高的NK4亚群比例，而与PD相关的CAR-NK产品则含有更多的NK0亚群；NK4亚群表现出较低的NF-κB信号通路基因表达和较高的MHC II基因表达，而NK0亚群则相反。此外， CBLB介导的泛素化可能在CAR-NK细胞治疗的疗效中起重要作用

总结

该研究证明了CD19-BBz CAR-NK细胞疗法在治疗R/R LBCL患者中的安全性和有效性，且未观察到严重的毒性反应。研究支持进一步在更大规模的患者群体中验证这种疗法的疗效，并探索其在其他B细胞恶性肿瘤中的应用潜力。此外，研究还揭示了CAR-NK细胞产品的分子特征和与疗效相关的免疫细胞相互作用网络，为未来的免疫疗法研究提供了新的视角。

参考文献

Lei, W., Liu, H., Deng, W. et al. Safety and feasibility of 4-1BB co-stimulated CD19-specific CAR-NK cell therapy in refractory/relapsed large B cell lymphoma: a phase 1 trial. Nat Cancer (2025). https://doi.org/10.1038/s43018-025-00940-3