【Ther Adv Hematol】马军教授团队证实NGS联合MFC在AML MRD评估中的价值

AML的MRD评估

急性髓系白血病（AML）是一种具有临床侵袭性的血液系统恶性肿瘤，其特点是未成熟的髓系细胞不受控制地增殖，导致正常造血功能衰竭。AML患者缓解后的复发是长期生存的主要障碍。微小残留病（MRD）评估已成为AML管理中的关键组成部分，能够提供治疗效果的敏感动态指标，并作为个性化治疗的重要预后指标。二代测序（NGS）通过检测与白血病相关的遗传突变，提供了一种用于评估MRD的方法。然而，无论是将NGS作为单一方法，还是与其他技术联合用于AML患者的MRD评估，仍需持续探索，以提高预后准确性并指导个性化治疗策略。

哈尔滨血液病肿瘤研究所马军教授团队开展研究，评估了AML患者在初始诊断和MRD监测不同阶段的基因突变情况，分析了不同阶段基因突变与患者预后的相关性，还通过结合多参数流式细胞术（MFC）和针对47个基因的靶向测序，对AML患者进行了预后评估，旨在加深对疾病动态变化的理解，并改善AML患者的分层管理与临床治疗。研究结果近日发表于《Therapeutic Advances in Hematology》。

研究方法&结果

研究方法：研究纳入69名成年AML患者，分别在初始诊断、巩固治疗第一天（C1D1）和2年MRD监测期间进行NGS检测（针对47个与AML相关的基因）。还整合了C1D1时的多参数流式细胞术（MFC）和NGS数据，以评估两种MRD技术联合时的预后意义。

患者：患者的男女比例为1:1.1（27名男性/29名女性）。患者的年龄范围为29至84岁，中位年龄为50.5岁。复发患者组的3年生存率为32.5%，而非复发患者组中未记录到死亡病例。在复发和非复发患者之间，初始临床特征未发现显著差异。根据C1D1阶段MFC阴性和阳性情况分组，MFC阳性患者中58.8%（10/17）复发，而MFC阴性患者中为26.9%（14/52）（p=0.001）。56名患者在诊断时进行了靶向测序。

样本采集时间表

突变检测率：在初诊、C1D1阶段和MRD监测期间（C1D1后两年内），通过靶向测序识别的突变检测率分别为98.21%、69.57%和84.31%，暗示这些突变可能对患者的疾病进展产生影响。在诊断或 C1D1 阶段，复发和未复发亚组之间未发现突变频率的统计学差异；但在MRD监测期间，复发患者的ETV6突变频率显著高于非复发患者（p<0.05）。

基因突变情况

(a) 不同时点（诊断时n=56，C1D1时n=69，CT-2Y时n=106）的基因突变总结；

(b) 不同时点基因突变的频率；

(c) 按复发情况分组的初始诊断时基因突变频率（n=50）；

(d) 按复发情况分组的C1D1阶段基因突变频率（n=61）；

(e) 按复发情况分组的CT-2Y期间基因突变频率（n=103）。

复发与非复发患者中基因突变的关联：在不同阶段，复发患者和非复发患者之间的平均VAF（变异等位基因频率）未观察到显著差异。但对于体细胞突变的VAF，CT-2Y期间复发和非复发亚组之间存在显著差异；排除意义未明的克隆性造血（CHIP）后计算体细胞突变的VAF，p值进一步降低。因此，排除CHIP后分析体细胞突变可能对判断患者的预后具有潜在意义。所有患者从初诊到C1D1阶段的平均VAF均显著下降（p<0.001），但在复发和非复发患者之间，VAF的变化值没有显著差异。对于复发患者，CT-2Y阶段的平均VAF显著高于C1D1阶段，而对于非复发患者，两个阶段的平均VAF没有显著变化。复发患者的平均VAF从C1D1阶段到CT-2Y阶段的变化为+0.123 ± 0.143，而非复发患者的变化仅为+0.008 ± 0.079，两组之间存在显著差异（p=0.002）。这些结果表明，以C1D1阶段的VAF为基线，监测后续VAF的变化可能有助于预测疾病进展。

AML患者平均VAF的总体情况

(a) 来自基因突变的VAF；

(b) 来自体细胞突变的VAF；

(c) 排除潜在CHIP后体细胞突变的VAF；

(d) 排除潜在CHIP后体细胞突变的VAF变化；

(e) 复发患者中排除潜在CHIP后体细胞突变的VAF；

(f) 无复发患者中排除潜在CHIP后体细胞突变的VAF；

(g) 从初诊到C1D1阶段，排除潜在CHIP后体细胞突变的VAF变化；

(h) 从C1D1阶段到CT-2Y阶段，排除潜在CHIP后体细胞突变的VAF变化。

不同时期突变VAF与生存的关联：C1D1阶段平均VAF（排除CHIP的体细胞突变）≤0.004和MRD监测期间≤0.020的患者预后更好。当使用 C1D1 期间的 VAF 作为基线时，CT-2Y期间 VAF 增加（排除CHIP的体细胞突变）为≦0.018的患者表现出良好的预后。与之相反，C1D1后第一年内 VAF 增加 >0.012的患者更容易复发。总体而言，监测 C1D1 和 CT-2Y 期间的 VAF 值及其变化可能对生存预测具有指导意义。

体细胞突变的VAF(排除CHIP）与预后的相关性

(a) 初诊时VAF对预后的影响；

(b) C1D1阶段VAF对预后的影响；

(c) CT-2Y阶段VAF对预后的影响；

(d) 从初始诊断到C1D1阶段VAF变化对预后的影响；

(e) 从C1D1阶段到CT-2Y阶段VAF变化对预后的影响。

C1D1阶段联合MFC和NGS MRD的预后价值：在C1D1阶段联合应用MFC和基于NGS的MRD（排除CHIP的体细胞突变）显示，两项检测均为阴性的患者比仅一项检测为阴性的患者生存期更长。此外，两者联合评估的灵敏度和特异性高于单独评估。

生存曲线

(a) 按NGS分类的生存曲线；

(b) 按NGS分类（排除CHIP）的生存曲线；

(c) 按MFC分类的生存曲线；

(d–f) 按MFC和NGS分类的生存曲线：

(d) 以基因突变作为NGS阳性；

(e) 以体细胞突变作为NGS阳性；

(f) 以体细胞突变作为NGS阳性（排除潜在CHIP）。

总结

联合评估的优势：MFC-MRD和NGS-MRD状态的联合评估提供更精细的预后分层，缺乏体细胞突变和MFC-MRD阴性与改善的无进展生存期相关，有望改善AML患者的临床预后评估。

基因突变动态变化：研究揭示了AML患者在治疗过程中基因突变的动态变化，强调了监测这些变化对于预测疾病进展的重要性。

预后标志物的潜力：ETV6突变频率在复发患者中显著增加，表明ETV6突变监测可能是预测复发的潜在标志物。

参考文献

Ther Adv Hematol . 2025 Jun 26:16:20406207251349261. doi: 10.1177/20406207251349261.